数字pcr定量技术原理视频讲解,PHP对象的浅复制与深复制的实例详解?

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PHP对象的浅复制与深复制的实例详解?

原型模式

用原型实例指定创建对象的种类,并且通过拷贝这些原型创建新的对象

原型模式是基于深复制和浅复制的,在Java里面有2种复制:

浅复制

将一个对象复制之后,生成一个新的对象,新对象的所有成员变量(基本类型或引用类型)都含有与原

有对象相同的值,如果原有对象的成员变量是基本数据类型,就会将这个变量的值拷贝一份到新对象

里面,如果原有对象的成员变量是引用数据类型,那么这个引用指向的对象不会新生成一份,而是,

在新对象里面的这个引用跟原有对象的引用指向的是同一个对象。

深复制

将一个对象复制之后,生成一个新的对象,新对象的基本数据类型变量含有与原有对象相同的值,如

果原有对象的成员变量是引用数据类型,在新对象里面,这些引用变量将指向被复制过的新对象,而

不再是指向原有的那些被引用的对象,深复制把要复制的对象所引用的对象都复制一遍。

比如:

有一个A对象,经过复制之后产生一个B对象,如果A里面有一个int型的变量i值为4,那么B对象里面

的inti的值也是4,A对这个int型变量的改变,不会影响B,如果A里面有一个成员变量c是引用类型

的,它指向了对象D,经过复制,B里面也会有一个c,这个c也指向D对象,A的c和B的c指向的是同一个

数字PCR和荧光定量PCR的区别?

数字pcr和荧光pcr哪个更准确在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digitalPCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。

定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。

因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。

PCR的原理是什么?

PCR的原理是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。

PCR(聚合酶链反应)是一种可以快速扩增特定DNA序列的实验技术。它的工作原理是,通过使用特殊的酶,以及DNA合成的特殊化学反应,来复制任意DNA序列。

PCR通常使用特定的引物与特定的模板DNA片段结合,然后使用DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶)在热重复循环中复制DNA片段。

pcr技术原理及步骤?

一、PCR技术基本原理有:

1、PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

2、PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:

①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;

②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;

③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

二、PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。

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